<培養細胞>

　　培養細胞總是會讓科研小白茶飯不思，擔驚受怕，即使大好春光出去陪美眉或者小哥哥，也會牽腸掛肚，心不在焉。

　　萬一污染了又要看到師兄師姐鄙視的目光，嫌棄的嘴角，還有因為污染造成其他戰友的驚恐不安，想想都怕怕。

　　師姐A：師妹！！！讓你養著玩的細胞又污染了。

　　師姐B：納尼？！

　　師姐C（火速趕往案發現場）：我的心肝寶貝細胞你還好么？

　　師兄A:天啊！！！并致電女票：“親愛的，晚上不能陪你了，新來的師妹細胞又污染了，我又要給培養箱滅菌了”。

　　師妹：我是罪人，好丟臉。像我這樣的小白如何避免細胞污染呢？

　　“師妹過來，師兄手把手教你，如何預防細胞污染。” 想當年師兄就是靠養細胞培養起來的重度潔癖。

　　常規操作不再贅述，主要安利以下內容：

　　1. 仔細閱讀所在實驗室的細胞室綜合管理制度，嚴格遵守制度。

　　2. 細胞室室內滅菌可以交叉進行，熏蒸、臭氧、紫外、新潔爾滅。

　　3. 根據細胞室空間，限制同時進入人數。

　　4. 超凈工作臺使用前后，紫外燈照射滅菌。使用前、后需用酒精棉球擦拭工作區消毒（小竅門：超凈臺使用完畢后，可以用酒精噴灑桌面，再用抽紙擦干凈，比用酒精棉球干凈多嘍！使用前不建議這種方法擦拭）。物品放入超凈臺前均應酒精噴灑消毒，超凈臺內嚴禁堆放過多物品，以免影響風路平衡。

　　5. 水浴鍋使用完畢后及時將水倒掉，并保持鍋內干燥。常用水浴鍋時，每周將水浴鍋中的水至少煮沸一次，以防細菌滋生。

　　6. 從培養箱取放細胞前，用酒精清潔雙手（或手套），盡量縮短開門時間和減少開門次數。培養瓶放入培養箱前，用酒精消毒表面，并稍等至酒精揮發后再放入，以免培養箱內滯留過多乙醇蒸氣。

　　7. 培養箱用水每周更換一次，更換前托盤用酒精擦拭、紫外燈照射30分鐘殺菌。

　　8. 滅完菌槍頭，烘箱烘干后存放，保質期1周。逾期需重新滅菌使用。

　　9. 培養液、胰酶、PBS等試劑盡量不和別人共用，應單獨分裝使用，以免交叉污染，也便污染后自查原因。

　　10.在使用0.22μm的微孔濾膜過濾自配溶液時，注意無菌操作規范，以防濾液污染。特殊情況可檢菌安全后使用。

　　11.除特殊要求外，建議培養基中添加雙抗，算是送給細胞的守護神。

　　12.防護服、口罩、手套缺一不可。隔壁細胞室負責人是韓國回來的博士，讓學生只戴手套操作，于是經常聽他們說細胞掛了。

　　13.操作前，準備好所有實驗所需物品，以減少走動；物品需有序擺放在超凈臺觸手可及的地方，同時空留足夠操作空間。

　　14.操作時，試劑不用盡量及時蓋上蓋子，移至操作區外圍，盡量不要從開口容器上經過。

　　15.使用移液槍時，將容器傾斜以便于移液，切勿將槍桿碰觸瓶口及內壁。一旦發生倒吸情況，要及時用酒精棉球擦拭，以免液體殘留導致細菌滋生。

　　16.先取試劑、耗材，再取移液槍、安槍頭。很多人習慣先安槍頭，然后去拿試劑、耗材，殊不知無意間槍頭已經觸碰其他地方導致污染。

　　17.向廢液缸打廢液時，需輕柔，以免造成水花四濺，污染槍頭、槍體。實驗結束，及時倒掉廢液缸垃圾，沖洗之后噴灑酒精，放入超凈臺紫外照射殺菌。

　　18.培養基滴在桌面時要及時用酒精棉球擦拭，切記不要等實驗做完再處理。因為那樣，你的臺面上就會留下一個印記，對于強迫癥的人來說，不！能！接！受！！！！

　　19.凍存細胞時凍存管蓋子需擰緊。復蘇細胞時，從液氮罐取出凍存管，輕擰蓋子，以確認蓋子是否擰緊。鑷子夾住凍存管蓋子與管體交界處，在37度水浴鍋中快速解凍，水面不可超過凍存管蓋沿；不建議直接扔進水中，以免水滲入造成污染。

　　20.一旦污染，及時處理，不到不得已不建議施救；查找原因，防止再犯。

　　總的來說，防患未然比亡羊補牢強得多。操作過程中對于模糊不清的，寧愿認為是有菌的棄掉，也不要心存僥幸！